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科研人员反复实验了600多次，终于在1958年10月，将拆合后的生物活性稳定恢复到原有活力的5%至10%。然而，更大的困难还在前方等着他们。胰岛素分子的全合成涉及200多步化学反应，任何一步反应产物不纯，都会影响下一步的合成与最终的结果。在大兵团作战期间，研究人员每天除了睡眠时间，几乎都在实验室。
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传统方法在设计能够催化特定化学反应的酶时，面临巨大挑战，主要是因为将活性位点整合到预先存在的蛋白质结构中时，往往会受到结构灵活性和活性位点预组织程度的限制，从而影响催化效率。尽管化学手段可以在一定程度上克服这些问题，但最初计算设计的酶效率仍远低于天然酶。
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